科研样本，本就来之不易。特别是动物死亡或新鲜组织离体后，极易发生组织自溶或细菌感染，影响后期病理诊断。科学、标准的样本采集方法可以有效保证诊断的可靠性、权威性。里来生物精心编辑病理样本收集、保存运输方法，与您分享！取材前准备工作1、动物取材前12h需进行禁食（不禁水）；2、准备取材所需物品：常规通用手术器械：解剖刀、外科手术剪、血管钳、手术镊，根据取材部位选取特殊器
科研样本，本就来之不易。
特别是动物死亡或新鲜组织离体后，极易发生组织自溶或细菌感染，影响后期病理诊断。
科学、标准的样本采集方法可以有效保证诊断的可靠性、权威性。
里来生物精心编辑病理样本收集、保存运输方法，与您分享！
取材前准备工作
1、动物取材前12h需进行禁食（不禁水）；
2、准备取材所需物品：
常规通用手术器械：解剖刀、外科手术剪、血管钳、手术镊，根据取材部位选取特殊器械（如取脑或骨等硬组织，推荐咬骨钳）；
防护类：手术服、手术帽、口罩、手套；
取材通用试剂耗材：麻醉药、注射器、生理盐水、滤纸、标签纸、记号笔；
取血需要：采血针、对应检测需要的采血管、离心管（离心取血清或血浆）；
病理固定样本采集：固定瓶、固定液；
病理冰冻样本采集：冻存管、液氮（速冻&短时间冻存）、干冰（运输冻存）、-80℃冰箱（长时间冻存）
3、取材前应做好各类组织器官样本编号记录。编号需体现该动物所属分组，编号，种属与编号组织器官名称等信息。
推荐进行三项准备：固定瓶或冻存管上进行编号标记、标签纸上编号标记并粘贴至对应容器、准备一份样本编号对应清单。
取材中各脏器采集要求
1、取材前需进行动物麻醉、放血，避免组织内部血液太多，固定不充分；
2、动物死亡或组织离体后需尽快（最长不可超过10分钟）固定或冻存，避免组织出现自溶；
3、取材需取同一脏器同一部位，后期实验结果才具有可比性；
4、取材时器械要锐利，避免出现挤压、刮抹而造成的组织变形、缺损；
5、组织浸入固定液前需进行生理盐水冲洗，避免组织固定不充分而影响组织基本形态；
特殊组织取材&固定注意事项
部分组织离体后极易自溶，或在常规固定液中无法快速固定，这类样本需采用特殊方法进行采集与固定，方可保证后期病理制片及诊断质量。
1、肠道：需清洗肠内容物，使肠绒毛游离，不影响后期制片：取材时需用生理盐水轻轻冲洗，再向肠道内注入固定液，慢慢推出内容物，肠道慢慢恢复至充盈状态时再浸入固定液。
2、脑组织：脑组织耐氧能力差，抗原易发生变性，尤其对于体型较大动物如大鼠、实验兔等的脑组织，因为体积过大或固定液极难渗入内部，需进行灌注取材来实现对脑组织的快速固定。
3、睾丸、眼球、脊髓、肌肉等组织：推荐使用对应的特殊固定液进行固定，以保证固定效果。
4、骨组织或钙化组织需进行充分脱钙，只有组织变软后才可取材。
一般方法为ETDA恒温慢脱，持续2-3个月左右，期间需定期修剪组织和换液，组织形态完好；也可加酸急脱，持续1周左右，组织形态不完整及抗原丢失。
脱钙完成后可进行取材，或置入75%酒精中保存寄送。
5、细胞爬片：爬片后用4%多聚甲醛固定0.5h，吸去固定液，如需寄送，则4℃保存并于2h内及时送样处理，否则将影响后期染色效果。
病理样本保存方法
固定法：
固定样本适用于标本的长期保存，且组织细胞形态结构保持较好，能准确定位组织细胞；
1、浸入法
从人体或动物取下的小块组织，立即置入液态固定剂中进行固定，这是最常用的方法。
通常标本与固定液的比例为1:10～1:20，但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透，2h以内需更换一次固定液。
2、灌注法
组织块体积过大或固定液极难渗入内部，则需要对整个脏器或整个动物体进行灌注。
将固定液注入血管，经血管分支到达整个组织和全身，从而得到充分的固定。普遍应用于脑部疾病的科学研究。利用天然血管网，快速、均匀地保存标本，以保持标本类似活体状态、尽量保持抗原性。
灌注法示意图
冻存法
冰冻样本能够较好的保存组织的抗原免疫活性，其制作过程较石蜡切片快捷、简便，缺点是细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构，可能会使抗原弥散。多应用于手术中的快速病理诊断
a)动物组织需尽快取材保存，取材应在冰上进行，取材后组织用生理盐水冲洗干净，去除血渍和污物，并剔除非研究所需的组织；
b)吸干水渍并切小块，放入已标记的保存容器中，液氮速冻后，转运至-80℃冰箱保存，运输时请使用大体积干冰运输。
样本寄送前评估&准备
固定样本，需观察：
1、固定液是否混浊、有异常颜色；
2、组织是否自溶，与固定液体积比是否在1：10-1：20；
3、固定瓶盖是否拧（封）紧；是否留有明显样本编号，且不易擦拭或脱落。
PS：高温或低温保存时，标签纸易撕下，标记易擦拭，需将标记做三项准备：记号笔标记、标签纸标记并粘贴、准备一份样本清单等。
4、固定瓶应选择不易漏，不易碎的密闭容器。如需寄送，瓶口需用封口胶封好，并整齐摆放在厚实泡沫箱中，样本之间摆放无间隙，但不可过于挤压。
冰冻样本：
1、可用液氮或干冰运输。EP管保存的样本需用干冰进行运输。
2、液氮样本需存于液氮罐提子中，留1/5以上空间塞上棉花，再放入液氮罐内。如不能当天寄送样本，需保证足量液氮，尽量减少开盖次数。
3、干冰样本需放于包装厚实的泡沫盒中。干冰保存的样本极易在运输途中碰裂，尽量备护垫、气泡膜包裹，不要过于挤压样本，保持正面向上，运输防止颠簸。干冰在包裹完整的泡沫盒中大约消耗3kg-5kg/天。
4、低温保存时，标签纸易撕下，标记易擦拭，需将标记做三项准备：记号笔标记、标签纸标记并粘贴、准备一份样本清单等。
其他样本寄送实验样本要求
（1）制片所需要的组织蜡块可由您提供或委托本试验中心制作，蜡块可常温保存；
（2）一般切片经脱蜡后可以进行后期的HE、masson、组化等染色实验；切片经防脱处理，可用于免疫组化实验。
（3）石蜡切片建议保存时间不超过半年，
（4）如需寄送切片，需用气泡垫包裹切片盒内盖，合盖后不会过于挤压切片，且轻微晃动切片盒时，没有明显切片晃动的声音。而后切片盒外包装使用气泡垫封装（如寄送冰冻切片，切片盒需与足量-20℃或适量-80℃冰袋一同包裹），放置于充满包装填充物的厚实泡沫盒中寄送。
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